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血清中乳酸含量的测定及不确定度评定

朱天翼 丁敏 段嫚雷 孟娇然

朱天翼,丁敏,段嫚雷,等. 血清中乳酸含量的测定及不确定度评定[J]. 计量科学与技术,待出版 doi: 10.12338/j.issn.2096-9015.2023.0353
引用本文: 朱天翼,丁敏,段嫚雷,等. 血清中乳酸含量的测定及不确定度评定[J]. 计量科学与技术,待出版 doi: 10.12338/j.issn.2096-9015.2023.0353
ZHU Tianyi, DING Min, DUAN Manlei, MENG Jiaoran. Determination and Uncertainty Assessment of Lactic Acid in Serum[J]. Metrology Science and Technology. doi: 10.12338/j.issn.2096-9015.2023.0353
Citation: ZHU Tianyi, DING Min, DUAN Manlei, MENG Jiaoran. Determination and Uncertainty Assessment of Lactic Acid in Serum[J]. Metrology Science and Technology. doi: 10.12338/j.issn.2096-9015.2023.0353

血清中乳酸含量的测定及不确定度评定

doi: 10.12338/j.issn.2096-9015.2023.0353
基金项目: 国家市场监督管理总局科技计划项目(2020MK026)。
详细信息
    作者简介:

    朱天翼(1997-),上海市计量测试技术研究院助理工程师,研究方向:化学计量及标准物质的研制,邮箱:zhuty@simt.com.cn

    通讯作者:

    孟娇然(1987-),上海市计量测试技术研究院高级工程师,研究方向:化学计量及标准物质的研制,邮箱:mengjr@simt.com.cn

Determination and Uncertainty Assessment of Lactic Acid in Serum

  • 摘要: 建立一种同位素稀释-气相色谱-质谱法测定血清中乳酸含量的方法,并对测量结果的不确定度进行评定。在血清样品中加入乳酸钠同位素标记物作为内标,样品经前处理及硅烷化衍生后,在选择离子扫描模式下用气相色谱串联质谱仪检测。采用建立的方法对五种不同浓度水平的血清中乳酸进行定量分析,结果表明方法线性良好,相关系数 $ r > 0.999 $,平均加标回收率为 101.2%~102.6%,相对标准偏差为 0.16%~0.59%(n = 6),五种浓度水平的血清中乳酸含量分别为1.16、2.01、5.50、10.02、15.63 mmol/L,结果的相对扩展不确定度 Urel 均小于 3.0%(k = 2)。方法重复性好、准确度高、结果可靠,可用于临床血清样品中乳酸含量的准确检测。
  • 图  1  不同色谱条件下乳酸的峰面积

    Figure  1.  Peak area of lactic acid under different chromatographic conditions

    图  2  三种血清蛋白沉淀剂处理后样品的总离子流图

    Figure  2.  Total ion chromatogram of samples treated with three different protein precipitants

    图  3  MTBSTFA 用量对乳酸衍生效果的影响

    Figure  3.  The effect of MTBSTFA dosage on the lactic acid derivatization

    图  4  衍生化反应温度、时间对乳酸衍生效果的影响

    Figure  4.  The effects of temperature and time on the lactic acid derivatization

    表  1  五种乳酸浓度血清的测定

    Table  1.   Detection of the concentration of lactic acid in five different serum

    乳酸浓度水平(mmol/L) 1 2 5 10 15
    线性方程 y =1.0257x+0.0342 y=1.0326x+0.0553 y=1.0694x−0.0014 y=0.9854x+0.0838 y=1.0329x+0.0394
    相关系数 r 1.0000 0.9998 0.9996 0.9999 0.9999
    血清中乳酸浓度(mmol/L) 1.16 2.01 5.50 10.02 15.63
    RSD 0.27% 0.31% 0.40% 0.23% 0.23%
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    表  2  五种乳酸浓度水平的加标回收率

    Table  2.   Recovery rates of added standards for five different lactic acid concentration

    乳酸添加水平(mmol/L)1251015
    平均加标回收率(%)101.3101.8101.2102.5102.6
    RSD(%)0.600.360.160.210.26
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    表  3  稳定同位素稀释气相色谱质谱法测定血清中乳酸不确定度汇总

    Table  3.   Summary of uncertainty in the determination of lactic acid in serum by stable isotope dilution gas chromatography mass spectrometry

    不确定度分量 乳酸浓度
    1 mmol/L 2 mmol/L 5 mmol/L 10 mmol/L 15 mmol/L
    质量比值 Rs 引入的相对标准不确定度 $ {u}_{\mathrm{r}\mathrm{e}\mathrm{l}}\left({R}_{\mathrm{s}}\right) $ 0.24% 0.36% 0.36% 0.44% 0.25%
    血清体积引入的相对标准不确定度 $ {u}_{\mathrm{r}\mathrm{e}\mathrm{l}}\left[V\left(\mathrm{s}\mathrm{e}\mathrm{r}\mathrm{u}\mathrm{m}\right)\right] $ 0.035% 0.035% 0.035% 0.035% 0.035%
    测量重复性引入的相对标准不确定度 $ {u}_{\mathrm{r}\mathrm{e}\mathrm{l}}\left[c\left(\mathrm{s}\mathrm{e}\mathrm{r}\mathrm{u}\mathrm{m}\right)\right] $ 0.10% 0.11% 0.15% 0.083% 0.080%
    加标回收率引入的相对标准不确定度$ {u}_{\mathrm{r}\mathrm{e}\mathrm{l}}\left(\overline{Re}\right) $ 0.79% 1.04% 0.68% 1.43% 1.44%
    分析方法的相对标准不确定度 $ {u}_{\mathrm{r}\mathrm{e}\mathrm{l}}\left({\mathrm{L}\mathrm{A}}_{\mathrm{I}\mathrm{D}-\mathrm{G}\mathrm{C}\mathrm{M}\mathrm{S}}\right) $ 0.83% 1.11% 0.78% 1.50% 1.46%
    分析方法的相对扩展不确定度Urelk = 2) 1.7% 2.3% 1.6% 3.0% 3.0%
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出版历程
  • 收稿日期:  2023-12-16
  • 录用日期:  2024-04-09
  • 修回日期:  2024-04-07
  • 网络出版日期:  2024-05-10

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